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第一篇猴属动物概况3

第1章 猕猴属分类、分布与保护现状3

1. 1猕猴属动物概况3

1.2猕猴属的分类与系统发育关系5

1.3猕猴属的起源与演化6

1.4猕猴属的地理分布及生物地理8

第2章 猕猴的分类、分布与保护10

2. 1猕猴的分类10

2. 2猕猴的分布11

2.2. 1地理分布11

2. 2. 2生态地理分布12

2.3猕猴的生态与行为13

2.3. 1社群、群体大小与组成13

2.3.2家域与食性13

2. 3.3社会行为与相互关系14

2.4猕猴资源的利用与保护现状16

参考文献20

第二篇 猕猴的生殖生理29

第3章 雌性猕猴生殖器官解剖组织结构及生理特性29

3. 1卵巢29

3.1.1猕猴卵巢组织解剖结构29

3. 1.2卵泡发生和卵泡闭锁现象32

3. 1. 3卵巢的周期性33

3. 1.4卵泡动力学与生殖激素34

3. 2输卵管43

3.3子宫及子宫颈44

3.4阴道及外生殖器44

第4章 雄性猕猴生殖器官解剖组织结构与生理特性46

4. 1睾丸46

4.1.1睾丸解剖结构46

4.1.2睾丸组织细胞结构47

4. 1. 3睾丸位置的变化与性成熟53

4.2附睾54

4. 3精液和精子55

4.4副性腺56

4. 4. 1精囊腺56

4. 4. 2前列腺56

4.4.3尿道球腺57

4. 5外生殖器57

4. 5. 1阴茎57

4. 5. 2阴囊57

4. 6雄性性腺激素58

4. 6. 1睾酮与ICSH58

4.6.2抑制素B与 FSH59

4.6.3前列腺素61

第5章 配子的产生63

5. 1原始生殖细胞的特化63

5. 2原始生殖细胞的迁移64

5.3原始生殖细胞的性别分化64

5. 4精子的发生和发育65

5. 5卵细胞的发生和发育65

5.5. 1原始滤泡的形成66

5. 5. 2原始滤泡的激活和生长66

5. 5. 3卵母细胞的发育及成熟67

5. 6猕猴卵母细胞的体外成熟培养68

5. 6. 1猕猴卵细胞体外成熟无血清培养体系的建立69

5. 6.2影响猕猴卵细胞体外成熟的因子69

5. 6. 3雌性个体的年龄和生殖周期对猕猴卵细胞成熟的影响71

5. 7排卵72

第6章 着床前胚胎的发育73

6. 1受精73

6. 1. 1精卵识别：透明带及其在精卵识别中的功能73

6. 1.2精子的顶体反应74

6. 1.3卵细胞的皮层反应74

6. 2着床前胚胎发育75

6.2.1母源因子对早期胚胎发育的调控75

6.2. 2着床前胚胎发育的表观遗传特征78

6. 2.3早期胚胎发育的细胞命运决定78

第7章 猕猴性成熟和性行为80

7. 1雌性猕猴的性成熟80

7. 2性皮肤80

7. 3性行为82

参考文献83

第三篇 猕猴的辅助生殖技术97

第8章 猕猴的体外受精与胚胎移植97

8. 1精子采集97

8.1.1精液采集的方法与原理97

8.1.2电刺激采集猕猴精液98

8.1.3精液液化99

8.2超数排卵99

8.2. 1灵长类超数排卵的研究历史100

8.2.2影响超数排卵的几种因素101

8.2.3超数排卵中的巨型卵泡的影响110

8.2.4预知超数排卵失败的因素111

8.2.5卵供体动物的选择和超数排卵处理最佳方案113

8. 2.6猕猴超数排卵失败的几种原因114

8. 2. 7超数排卵和卵母细胞采集的流程115

8. 3猕猴卵母细胞体外成熟培养方法119

8.3. 1卵巢中分离未成熟卵母细胞的分离培养119

8. 3.2超数排卵未成熟卵母细胞分离培养及操作要点（腹腔镜介导取卵）121

8.4体外受精、单精子注射、孤雌激活122

8.4. 1猕猴的体外受精技术123

8.4.2单精子注射126

8.4.3孤雌激活129

8.5猕猴胚胎移植131

8.5. 1胚胎移植受体的选择132

8. 5. 2胚胎移植的部位与方法133

8.5.3猕猴早期妊娠诊断134

8. 5.4猕猴妊娠后的阴道流血135

附件1猕猴超数排卵计划和任务书编写内容136

附件2猕猴超数排卵实时记录表137

第9章 胚胎分割138

9.1胚胎分割的研究简史138

9. 2胚胎分割的应用139

9. 3灵长类胚胎分割的研究进展139

9.4胚胎分割的原理和方法140

9. 4. 1胚胎分割的原理140

9.4. 2胚胎分割的方法141

9.4.3分割胚胎的培养与发育142

9.4.4影响分割胚发育的因素143

9. 5猕猴胚胎分割技术145

9.5. 1桑椹胚和囊胚期胚胎分割145

9. 5. 2猕猴胚胎146

9.5.3胚胎分割方法146

9.5.4分割胚的体外培养147

9. 5. 5分割胚的移植147

9.5. 6猕猴早期胚胎卵裂球分割（分离）148

第10章 种质细胞冷冻保存151

10. 1猕猴种质资源冷冻保存的意义和研究进展151

10.2种质细胞冷冻保存的原理154

10.2.1细胞冷冻保存的原理154

10. 2. 2细胞冷冻损伤的假说155

10.2.3冷冻保护剂的种类和作用157

10.3猕猴精子的冷冻保存163

10.3. 1猕猴精子的低温生物学特征163

10. 3.2渗透性冷冻保护剂的浓度和种类对猕猴冷冻复苏精子功能的影响164

10. 3.3非渗透性冷冻保护剂——糖对猕猴冷冻复苏精子功能的影响165

10.3.4猕猴精子冷冻保存的方法167

10.4猕猴卵母细胞和胚胎的冷冻保存169

10.4. 1卵母细胞的低温生物学特征169

10.4.2猕猴卵母细胞冷冻保存的方法170

10.4.3猕猴胚胎冷冻保存的方法（慢速冷冻和玻璃化冷冻法）170

第11章 猕猴胚胎干细胞173

11. 1猕猴胚胎干细胞的分离与鉴定173

11. 1. 1非人灵长类胚胎干细胞的分离建系173

11. 1.2非人灵长类胚胎干细胞的鉴定178

11. 1.3非人灵长类胚胎干细胞培养体系的改进182

11. 1.4胚胎干细胞分离技术的改进184

11.2猕猴胚胎干细胞的分离建系与培养185

11. 2. 1小鼠胚胎成纤维细胞的培养185

11.2. 2小鼠胚胎成纤维细胞的冻存187

11. 2. 3小鼠胚胎成纤维细胞的辐照处理188

11.2. 4小鼠胚胎成纤维细胞的复苏189

11. 2. 5小鼠胚胎成纤维细胞的丝裂霉素处理和饲养层细胞的准备190

11.2. 6猕猴着床前胚胎的体外培养191

11.2. 7猕猴胚胎干细胞的分离191

11. 3猕猴胚胎干细胞的鉴定201

11. 3. 1猕猴胚胎干细胞的形态学观察201

11. 3. 2猕猴胚胎干细胞免疫荧光染色的鉴定202

11.3. 3猕猴胚胎干细胞核型的鉴定204

11.3.4猕猴胚胎干细胞的体外分化207

11. 3.5 猕 猴胚胎干细胞的体内分化211

第12章 猕猴转基因技术214

12. 1引言214

12. 2转基因动物的原理和技术方法215

12. 2. 1显微注射法216

12.2.2反转录病毒载体导入法217

12.2. 3体细胞核移植法218

12.2.4人染色体介导法218

12. 2.5性腺转基因方法219

12. 2. 6定点制作转基因动物的方法219

12. 3转基因猕猴制备技术221

12.3. 1制备高滴度的VSV-G假型慢病毒221

12. 3. 2病毒滴度测定222

12. 3. 3实验动物：供体和受体的选择223

12. 3.4超排和取卵223

12. 3. 5卵周隙注射慢病毒223

12.3. 6体外培养224

12. 3. 7辅助孵化224

12.3.8受体猴的选择及胚胎移植224

12.3. 9怀孕的确认和监测225

12.3. 10新生猴的护理225

12. 3. 11新生动物的转基因确认225

12. 3. 12基因组DNA提取、PCR分析和Southern杂交分析226

12. 3. 13转基因猕猴组织的免疫组织化学分析226

12.4转基因猕猴的应用与展望226

参考文献228

第四篇 猕猴的繁殖管理247

第13章 猕猴的饲养与管理247

13. 1饲养环境247

13.1.1动物笼舍247

13. 1.2温度250

13. 1. 3相对湿度250

13. 1.4光照250

13. 1. 5噪声250

13.2猕猴的饲养管理251

13.2. 1检疫猴群管理251

13.2. 2繁殖猴群管理255

13. 2. 3幼猴的人工抚育257

13. 2. 4其他猴群饲养管理259

第14章 猕猴的营养需求261

14. 1猕猴的习性261

14. 1. 1猕猴的食性261

14.1.2消化261

14.2猕猴的营养需要与饲养标准261

14. 2. 1维持需要262

14.2.2生产需要263

14.2.3猕猴的饲养标准263

14. 3猕猴饲料配方设计265

14. 3. 1正确选择猕猴的饲养标准265

14. 3.2采用合理的饲料配方设计方法265

14. 3. 3添加剂预混料配方设计266

14.3. 4原料选择267

14.3. 5实验验证,确定合理配方267

第15章 猕猴常见疾病及其防治269

15. 1细菌性疾病269

15. 1. 1沙门菌病269

15. 1. 2细菌性痢疾269

15. 1. 3细菌性肺炎270

15. 1.4结核病271

15. 2病毒性疾病271

15. 2. 1猴疱疹病毒感染271

15. 2.2猴D型反转录病毒感染272

15. 2. 3猴免疫缺陷病毒感染273

15.2.4猴痘274

15.2. 5猴出血热274

15.2. 6猴麻疹275

15. 3寄生虫病276

15.3.1阿米巴病276

15. 3. 2结肠小袋纤毛虫276

15. 3. 3毛首鞭形线虫277

15. 3.4鞭毛虫277

15.3. 5粪类圆线虫病277

第16章 猕猴的福利管理278

16. 1动物福利概述278

16. 2我国动物福利现状278

16. 3猕猴福利管理280

16. 3. 1饲养环境福利280

16.3. 2猕猴营养282

16.3. 3猕猴的检疫与疾病治疗283

16.3. 4饲养环境的多样性286

16. 3. 5生物医学研究中猕猴的福利286

第17章 国内外有关实验动物的法律法规289

17. 1中国289

17. 2欧洲290

17. 3美国291

17.4日本292

参考文献294

附录 缓冲液和培养液配制表295

索引300