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第一篇 医学细胞生物学实验技术1

第一章 显微镜技术1

实验一 光学显微镜技术1

一、普通光学显微镜的结构和使用4

二、特殊光学显微镜的结构与使用8

实验二 显微摄影技术16

一、照相显微镜各部件的选择及应用16

二、感光片（胶卷）的选择17

三、滤光片的选择18

四、感光片的暗室加工19

实验三 电子显微镜技术20

一、透射电镜的结构和使用23

二、扫描电镜的结构和使用23

三、电镜样品制备技术和方法24

四、电镜样品的观察、识别和分析25

第二章 细胞的形态结构与细胞器27

实验四 细胞的形态结构与细胞器27

一、细胞结构的观察28

二、细胞器的超活染色与观察30

三、细胞的超微结构35

四、细胞的显微测量37

实验五 死活细胞的鉴别与分离39

一、染色排除法鉴别死活细胞39

二、荧光排除法鉴别死活细胞40

三、死活细胞分离40

实验六 细胞组分（细胞器）的分级分离41

一、细胞核的分离提取41

二、高速离心分离提取线粒体42

第三章 细胞生理与细胞化学44

实验七 细胞的生理活动44

一、细胞的吞噬活动44

二、草履虫纤毛运动及食物泡的形成45

三、暗视野观察细胞的纤毛和鞭毛运动45

四、细胞膜的渗透性实验46

五、细胞的凝集反应47

实验八 细胞化学48

一、普通细胞化学49

二、酶细胞化学50

三、荧光细胞化学51

四、免疫细胞化学52

第四章 综合性实验53

实验九 骨髓细胞染色体标本的制备及观察53

一、小鼠骨髓染色体标本的制备与观察53

二、人骨髓细胞染色体标本的制备技术55

实验十 细胞增殖与细胞凋亡56

一、有丝分裂标本制备与观察57

二、减数分裂标本制备与观察59

三、细胞凋亡的检测64

第五章 细胞培养与细胞工程技术66

第一节 培养细胞的生存条件66

第二节 细胞培养的基本技术70

第三节 体外培养细胞的取材方法与原代细胞培养71

第四节 培养细胞的生长特性与形态分型73

第五节 培养细胞的计数、生长曲线与分裂指数测定75

第六节 培养细胞的冻存、复苏与运输75

第七节 细胞系或细胞株的建立76

实验十一 动物细胞培养及相关实验技术77

一、实验室无菌操作技术78

二、细胞的原代培养技术78

三、细胞的传代培养技术80

四、体外培养细胞的计数和活力测定技术81

五、体外培养细胞的冻存与复苏技术82

实验十二 细胞融合与细胞核移植技术83

一、细胞融合技术85

二、细胞核移植技术85

第二篇 医学遗传学实验技术88

第六章 细胞遗传学实验技术88

实验十三 人类性染色质标本制备技术89

一、X染色质标本制备与观察89

二、Y染色质标本制备与观察90

实验十四 人类染色体标本制备技术91

一、外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备技术92

二、其他组织细胞的染色体标本制备95

实验十五 人类染色体显带与染色体高分辨显带技术99

一、人类染色体G显带标本制备100

二、人类染色体高分辨显带技术101

三、人类染色体C显带标本制备103

四、人类染色体Q显带标本制备104

五、人类染色体R显带标本制备105

六、人类染色体T显带标本制备106

七、人类染色体NOR带标本制备107

实验十六 核型分析与人类异常核型观察分析109

一、人类正常非显带染色体核型分析109

二、人类染色体G显带核型分析112

三、人类异常核型的观察和分析115

实验十七 离体细胞染色体畸变检测方法及技术118

一、受试物对细胞增殖的半数抑制剂量测定118

二、试验设计119

三、染色体畸变标本制备及观察119

实验十八 人类脆性X染色体标本制备120

一、外周血淋巴细胞脆性X染色体标本制备122

二、绒毛细胞脆性X染色体标本制备122

三、羊水细胞脆性X染色体标本制备122

四、脆性X染色体标本观察123

实验十九 人类SCE和微核检测技术123

一、SCE标本制备与观察125

二、微核检测技术126

实验二十 荧光原位杂交技术129

第七章 生化遗传学实验技术133

实验二十一 先天性代谢病筛查的细菌抑制实验133

实验二十二 先天性代谢病的尿筛查实验135

一、氨基酸代谢病的尿筛查方法136

二、糖代谢病的尿筛查实验141

实验二十三 酶活性测定技术143

第八章 分子遗传学实验技术146

实验二十四 基因组DNA的提取、纯化、酶解和电泳分离146

一、DNA的提取149

二、DNA的纯化151

三、人类基因组DNA的限制性核酸内切酶水解152

四、DNA酶切片断的凝胶电泳分离152

实验二十五 聚合酶链反应扩增DNA片段及检测156

一、PCR扩增DNA片断及检测157

二、其他几种PCR相关技术介绍158

实验二十六 PCR-SSCP法检测分析技术160

实验二十七 致病基因的RFLP连锁分析163

实验二十八 分子杂交技术165

一、斑点杂交166

二、等位基因特异性寡核苷酸杂交法167

三、Southern印迹杂交167

四、Northern印迹杂交171

五、Western印迹杂交172

实验二十九 STR位点复合扩增技术173

一、DNA提取174

二、PCR扩增175

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳175

四、银染检测176

第三篇 设计性与探索性实验177

第九章 实验设计的原理与方法177

第一节 实验设计的概念、特点和分类177

第二节 实验设计的基本要素178

第三节 实验设计的基本原则179

第四节 常用的实验设计思路181

第五节 实验设计的基本内容与方法181

第十章 细胞生物学与遗传学实验设计与选题183

第一节 设计性实验及其在人才培养中的作用183

第二节 设计性实验的操作过程185

第三节 实验设计的实例分析187

第四节 可供实验设计选题目录189

附录194

附录Ⅰ实验器械的清洗和处理194

附录Ⅱ实验室常用灭菌和除菌方法196

附录Ⅲ细胞生物学与遗传学实验常用试剂的配制198

附录Ⅳ常用培养基和抗生素的配制208

附录Ⅴ离心机转速与离心力的列线图（换算）209

附录Ⅵ流式细胞仪分析技术210

附录Ⅶ生物样品的储存、邮送与实验室安全214

附录Ⅷ常用生物学数据216

附录ⅨⅩ实验常用软件和数据库介绍218

附录Ⅹ有关细胞生物学和医学遗传学的主要网站227

附录ⅩⅠ人类某些遗传性状（疾病）的调查分析228

附录ⅩⅡ系谱分析232

附录ⅩⅢ皮纹分析236

附录ⅩⅣ遗传病的发病风险估计、Bayes法的应用及常见遗传病的遗传咨询242

附录ⅩⅤ缩略语表250

实验报告书写要求252

参考文献与网站255