图书介绍
基因工程实验指导 第3版PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载
- 朱旭芬主编；严庆丰副主编；陈宏宇等编 著
- 出版社： 北京：高等教育出版社
- ISBN：9787040439519
- 出版时间：2016
- 标注页数：243页
- 文件大小：34MB
- 文件页数：254页
- 主题词：基因工程－实验－高等学校－教材
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图书目录
实验计划表1
导论5
第一节 基因工程的四大要素7
第二节 基因克隆的策略11
1核酸的提取与检测14
1-1 基因组DNA的提取15
1-2 总RNA和mRNA的提取20
1-3 噬菌体DNA的提取24
1-4 质粒DNA的提取28
1-5 核酸的检测32
1-6 脉冲场凝胶电泳38
1-7 宏基因组文库的构建40
2靶基因的获取46
2-1 PCR扩增47
2-2 目的基因片段的获取52
2-3 探针的标记及检测55
2-4 核酸探针筛选基因文库62
2-5 反转录PCR66
2-6 RACE方法71
2-7 反向PCR76
2-8 SiteFinding-PCR79
2-9 功能基因的活性筛选83
3基因定点突变、沉默与敲除85
3-1 基因定点突变86
3-2 基因沉默技术89
3-3 酵母基因的敲除95
3-4 哺乳动物基因的敲除97
3-5 植物基因的敲除102
4质粒的重组108
4-1 T-A克隆109
4-2 感受态细胞的制备111
4-3 重组质粒的转化114
4-4 阳性克隆的筛选117
4-5 DNA序列测定与序列同源性分析119
5原核表达系统的构建与诱导表达126
5-1 DNA的酶切反应127
5-2 靶DNA片段的分离纯化130
5-3 DNA片段的连接132
5-4 表达质粒的构建136
5-5 Southern印迹140
5-6 靶基因的诱导表达147
5-7 SDS-PAGE152
6真核表达系统的构建与表达158
6-1 外源基因在酵母中的表达159
6-2 外源基因在哺乳动物细胞中的表达166
6-3 外源基因在植物细胞中的表达171
6-4 qRT-PCR分析175
6-5 Northern印迹180
6-6 Western印迹186
6-7荧光原位杂交192
7蛋白质的分析与目标产物分离196
7-1 免疫荧光与激光共聚焦197
7-2 双向电泳200
7-3 酵母双杂交206
7-4 蛋白质浓度的测定209
7-5 亲和层析213
参考文献223
附录1 名词缩写226
附录2 实验操作及仪器使用注意事项230
附录3 如何撰写实验报告234
附录4 常用碱基、氨基酸符号及缓冲液236
附录5 大肠杆菌基因型240
附录6 实验仪器242