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第一章　动物生物化学实验常识1

第一节　动物生化实验技术发展简史1

第二节　动物生化实验室常识与规则2

一、实验室规则2

二、实验室安全及防护知识2

第三节　生化实验基本操作3

一、玻璃仪器的洗涤3

二、刻度吸管的使用4

三、微量移液器的使用5

四、试管中液体的混匀法5

二、血清的制备6

一、血液样品的采集6

第四节　常用实验样品的处理6

三、全血及血浆的制备7

四、无蛋白血滤液的制备8

五、生物大分子的基本制备技术9

第五节　实验报告的撰写规范15

一、实验记录15

二、定性实验报告书写格式16

三、定量实验报告书写格式16

第二章　常用生化实验技术原理及应用17

第一节　离心技术的原理及应用17

一、离心技术的基本原理17

二、离心机的主要类型17

三、常用的离心分离方法18

四、离心操作的注意事项20

第二节　光度测定法的原理及应用21

一、分光光度法的基本原理21

二、光度法的计算22

三、使用分光光度计的注意事项24

四、自动生化分析技术24

第三节 电泳技术的原理及应用25

一、影响电泳迁移率的因素25

二、几种常用的电泳法26

第四节　层析技术的原理及应用32

一、层析技术的常用术语32

三、常用的层析方法33

二、层析技术的分类33

四、柱层析的基本装置34

五、柱层析的基本操作34

第五节 DNA重组技术37

一、多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）的基本过程37

二、DNA重组技术（Recombinant DNA Technology）38

三、DNA重组技术的基本步骤38

第三章 酶学实验内容40

实验一 唾液淀粉酶活性观察40

实验二 转氨酶活性测定——King氏法43

实验三 琥珀酸脱氢酶的作用及竞争性抑制的观察46

Ⅰ．福林－吴宪氏法48

实验四 血糖的测定48

第四章 糖类实验内容48

Ⅱ．葡萄糖氧化酶法50

实验五 肝糖原的提取和鉴定52

第五章 脂类实验内容54

实验六 血清总脂含量测定（香草醛法）54

实验七 肝组织的生酮作用56

实验八 血清游离脂肪酸测定（一次提取比色法）59

实验九 血清总胆固醇测定（胆固醇氧化酶法）61

第六章 蛋白质实验内容63

实验十 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质63

Ⅰ．双缩脲法66

实验十一 蛋白质的含量测定66

Ⅱ．Folin－酚试剂法67

Ⅲ．紫外光吸收法68

Ⅳ．考马斯亮蓝结合法69

实验十二 血清尿素氮（BUN）的测定（二乙酰一肟法）70

实验十三 氨基酸纸上层析72

第七章 核酸实验内容75

实验十四 动物组织DNA提取75

实验十五 DNA的定量测定（二苯胺法）77

实验十六 动物肝脏总RNA的制备79

实验十七 RNA的定量测定（地衣酚法）81

实验十八 紫外吸收法测定核酸的含量83

实验十九 维生素B2的定量测定（荧光法）85

第八章 维生素实验内容85

实验二十 维生素C的提取和含量测定87

第九章 综合性实验内容89

实验二十一 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同功酶89

实验二十二 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量92

实验二十三 碱性磷酸酶的分离制备及活性检测97

Ⅰ．碱性磷酸酶的有机溶剂分级沉淀97

Ⅱ．碱性磷酸酶的活性与比活性测定99

实验二十四 血浆IgG的分离、纯化及鉴定104

Ⅰ．盐析法分离制备血浆IgG104

Ⅱ．凝胶过滤法脱盐和分离IgG106

Ⅲ．DEAE－离子交换剂纯化血浆IgG108

Ⅳ．聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度110

实验二十五 细胞色素C的制备及其测定115

实验二十六 目的基因的PCR扩增及产物的电泳检测117

Ⅰ．目的基因的PCR扩增117

Ⅱ．扩增产物的琼脂糖凝胶电泳118

附录121

附录1 常用缓冲溶液的配制方法121

附录2 实验室中常用酸碱密度和浓度的关系126

附录3 常用洗液的配制127

附录4 层析法常用数据表及性质127

附录5 硫酸铵溶液饱和度计算表129

附录6 生物化学相关专业部分因特网网址130

参考文献131