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鼠伤寒沙门菌腺苷酸环化酶和cAMP受体蛋白缺失株的特性
  • 廖成水著 著
  • 出版社: 中国原子能出版社
  • ISBN:9787502276355
  • 出版时间:2016
  • 标注页数:124页
  • 文件大小:18MB
  • 文件页数:137页
  • 主题词:沙门氏杆菌属-腺苷酸环化酶-研究;沙门氏杆菌属-蛋白质-研究

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图书目录

第一章 绪论1

1.1 鼠伤寒沙门菌及其危害1

1.1.1 主要生物学特点3

1.1.2 流行病学7

1.1.3 诊断与防治8

1.2 减毒鼠伤寒沙门菌11

1.2.1 减毒沙门菌的研究背景11

1.2.2 用于鼠伤寒沙门菌减毒的相关致病因子12

1.2.3 鼠伤寒沙门菌的减毒19

1.2.4 减毒鼠伤寒沙门菌的入侵与免疫机制25

1.3 减毒鼠伤寒沙门菌作为活载体研究28

1.4 展望31

第二章 鼠伤寒沙门菌缺失菌株△crpSL1344和△cyaSL1344的构建与鉴定36

2.1 材料36

2.1.1 细菌菌株、质粒和培养条件36

2.1.2 主要试剂和培养基38

2.1.3 主要培养基及抗生素的配制38

2.1.4 主要试剂的配制39

2.1.5 主要实验器材40

2.2 方法40

2.2.1 PCR引物的设计与合成40

2.2.2 细菌的活化47

2.2.3 细菌基因组DNA的制备48

2.2.4 质粒的制备48

2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)49

2.2.6 细菌或重组质粒的PCR鉴定50

2.2.7 重组质粒的酶切鉴定50

2.2.8 PCR产物或酶切产物的回收与纯化51

2.2.9 目的片段的连接及其产物的转化52

2.2.10 鼠伤寒沙门菌SL1344株crp及cya基因的克隆与鉴定52

2.2.11 重组自杀性质粒pRE△cya的构建53

2.2.12 鼠伤寒沙门菌缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344的构建54

2.3 结果与分析55

2.3.1 SL1344株crp、cya基因的克隆与序列分析55

2.3.2 重组自杀性质粒pRE△cya的构建56

2.3.3 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344的筛选59

2.4 讨论63

2.4.1 重组自杀性质粒的特性及应用63

2.4.2 靶标基因的选择及其缺失意义65

2.5 小结66

第三章 鼠伤寒沙门菌缺失菌株△crpSL1344和△cyaSL1344生物学特性比较研究67

3.1 材料67

3.1.1 菌株、试剂和培养基67

3.1.2 实验动物与药敏纸片68

3.1.3 主要培养基及试剂配制68

3.1.4 主要实验器材69

3.2 方法70

3.2.1 沙门菌的特异性PCR鉴定70

3.2.2 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344的表型鉴定70

3.2.3 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344遗传稳定性测定71

3.2.4 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344耐药性检测71

3.2.5 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344生长特性鉴定71

3.2.6 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344的毒力测定71

3.3 结果与分析72

3.3.1 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344的表型鉴定72

3.3.2 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344耐药性检测75

3.3.3 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344遗传稳定性测定76

3.3.4 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344生长特性鉴定77

3.3.5 缺失菌株△crpSL1344、△cyaSL1344的毒力测定78

3.4 讨论80

3.4.1 基因缺失对表型的影响81

3.4.2 基因缺失对毒力的影响82

3.5 小结83

第四章 鼠伤寒沙门菌缺失株△cyaSL1344的免疫保护研究86

4.1 材料86

4.1.1 菌株、试剂和培养基86

4.1.2 实验动物86

4.1.3 主要培养基及试剂配制86

4.1.4 主要实验器材87

4.2 方法87

4.2.1 雏鸡沙门菌的免疫程序87

4.2.2 免疫接种对雏鸡生长发育的影响87

4.2.3 缺失菌株在体内的存活时间检测87

4.2.4 免疫雏鸡细胞免疫水平检测88

4.2.5 免疫雏鸡ELISA抗体检测88

4.2.6 △cyaSL1344缺失菌株对鼠伤寒沙门菌强毒株攻击雏鸡的保护性评价88

4.2.7 △cyaSL1344缺失疫苗对鸡白痢沙门菌强毒株攻击雏鸡的保护性评价88

4.3 结果与分析88

4.3.1 缺失菌株△cyaSL1344免疫接种对雏鸡的生长发育的影响88

4.3.2 缺失菌株△cyaSL1344缺失菌株在体内的存留时间89

4.3.3 缺失菌株△cyaSL1344免疫雏鸡后细胞免疫水平检测89

4.3.4 缺失菌株△cyaSL1344免疫雏鸡后ELISA抗体检测90

4.3.5 △cyaSL1344缺失菌株对鼠伤寒沙门菌强毒株攻击雏鸡的保护性评价90

4.3.6 △cyaSL1344缺失疫苗对鸡白痢沙门菌强毒株攻击雏鸡的保护性评价91

4.4 讨论91

4.5 小结95

第五章 展望100

参考文献100

附录114

附录一 英文缩写词表114

附录二 cya碱基序列116

附录三 cya氨基酸序列118

附录四 crp碱基序列118

附录五 crp氨基酸序列119

附录六 pBluscriptII SK(+)载体氨基酸序列119

后记122

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