图书介绍
基因工程及其分子生物学基础 基因工程分册 第2版PDF|Epub|txt|kindle电子书版本网盘下载
- 静国忠编著 著
- 出版社： 北京市：北京大学出版社
- ISBN：9787301155462
- 出版时间：2009
- 标注页数：262页
- 文件大小：47MB
- 文件页数：270页
- 主题词：基因－遗传工程－高等学校－教材；分子生物学－高等学校－教材
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图书目录
1基因工程的四大要素及实施要点1
1.1基因工程操作中常用的工具酶1
1.2基因的分离6
1.3基因工程载体14
1.4受体细胞和重组基因的导入30
1.5基因重组的方法33
1.6基因重组体的筛选37
2外源基因在宿主细胞中的高效表达41
2.1有效的转录起始与基因的高效表达41
2.2 mRNA的有效延伸和转录终止与基因的高效表达42
2.3 mRNA的稳定性与基因的高效表达43
2.4有效的翻译起始与基因的高效表达43
2.5遗传密码应用的偏倚性与基因的高效表达45
2.6 mRNA的二级结构与基因的高效表达50
2.7 RNA的加工与基因的高效表达50
2.8 mRNA序列上终止密码的选择50
2.9表达质粒（或载体）的拷贝数及稳定性与基因的高效表达51
2.10外源蛋白的稳定性与基因的高效表达51
3基因的融合和融合蛋白的表达53
3.1利用基因融合技术表达外源基因的缘由53
3.2基因融合的策略53
3.3基因融合和重组蛋白的产生55
3.4基因融合和展示筛选56
3.5基因融合和蛋白分泌56
3.6融合蛋白的纯化57
3.7融合蛋白的位点特异性切割57
附录 重组蛋白表达和纯化中常用的融合标签58
4外源基因的分泌表达63
4.1外源基因在E.coli细胞中的分泌表达63
4.2外源基因在枯草杆菌中的分泌表达65
4.3 α-因子前导序列介导的酵母细胞分泌系统66
4.4外源基因在哺乳动物细胞中的分泌表达69
5重组蛋白的正确折叠及修饰71
5.1重组蛋白的可溶性表达和折叠71
5.2重组蛋白的重折叠74
5.3外源蛋白在翻译后的修饰77
6几种真核细胞表达系统78
6.1哺乳动物细胞表达系统78
6.2外源基因在哺乳动物细胞中的组成性表达和诱导性表达86
6.3核型多角体病毒为载体的昆虫（细胞）表达系统87
6.4转基因动物及其应用95
6.5转基因植物及其应用97
6.6 DNA疫苗98
7分子杂交技术100
7.1探针与目标核酸相互作用的原理100
7.2探针的选择和特异性102
7.3杂交的速率与探针长度、浓度及杂交加速剂的关系103
7.4杂交的最适条件105
7.5放射性探针的制备106
7.6非放射性探针的制备112
7.7放射性和非放射性标记探针的应用范围115
7.8 DNA微阵列——基因组芯片116
8粒子轰击和基因转移119
8.1粒子轰击技术简介119
8.2粒子轰击技术的应用范围119
9聚合酶链反应及其应用122
9.1聚合酶链反应的原理122
9.2标准的PCR扩增方案122
9.3 PCR引物及其设计123
9.4关于热稳定的DNA聚合酶133
9.5 PCR对模板质量的要求134
9.6 PCR反应缓冲液和循环（周期）数135
9.7 PCR相关技术的原理及其应用136
10各种生物学展示技术152
10.1噬菌体展示技术152
10.2细菌展示技术157
10.3酵母展示技术159
10.4核糖体展示技术160
10.5 mRNA展示技术162
11基因打靶技术及其应用166
11.1同源重组与基因打靶166
11.2组织特异性的基因打靶171
11.3转座子介导的基因打靶174
11.4 RNA干涉与基因敲除178
11.5反义核酸技术180
11.6细菌基因敲除方法180
11.7基因打靶技术的应用181
12 DNA序列分析183
12.1 Sanger的双脱氧链终止测序法183
12.2 Maxam-Gilbert DNA化学降解法186
12.3关于变性聚丙烯酰胺测序凝胶187
12.4全基因组DNA序列的分析187
13基因突变190
13.1寡核苷酸介导的基因突变190
13.2盒式突变法200
13.3利用PCR进行DNA序列的突变201
13.4关于随机突变205
14寡核苷酸的化学合成210
14.1寡核苷酸片段固相合成的原理及步骤210
14.2寡核苷酸片段的纯化及鉴定214
15蛋白质相互作用及其分析方法218
15.1蛋白质相互作用的重要性218
15.2蛋白质相互作用所产生的结果218
15.3蛋白质相互作用的类型219
15.4酵母双杂交系统219
15.5利用绿色荧光蛋白（GFP）片段重组装研究蛋白质相互作用——细菌双杂交法222
15.6蛋白质相互作用分析的in vitro方法224
16蛋白质-核酸相互作用237
16.1研究蛋白质-核酸相互作用的重要性237
16.2蛋白质-核酸相互作用的类型237
16.3蛋白质-核酸相互作用分析的in vitro方法237
17蛋白质工程概述244
17.1蛋白质分子的结构分析244
17.2蛋白质的结构预测与分子设计245
17.3基因工程是实现蛋白质工程的关键技术246
参考文献248