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第一部分 流行性感冒病毒1

第一章 概论及历史1

第二章 流感病毒的分类与命名5

一、概况5

二、流感病毒的分类5

三、流感病毒的命名6

四、型与亚型的划分7

五、代表性毒株7

第三章 流感理化与生物学特性11

一、概况11

二、理化特性11

三、生物学特征11

第四章 流感病毒的形态、结构和功能16

一、形态和结构16

二、流感病毒基因及其产物16

第五章 流感病毒的复制34

一、概况34

二、复制步骤34

三、流产和无效复制38

四、异常病毒复制和缺损病毒形成38

五、干扰39

第六章 流感病毒的变异41

一、概况41

二、致病性变异41

三、相变异42

四、抗原性变异42

第七章 流感的发病机理和临床特征48

一、发病机理48

二、临床特征48

三、不同人群对流感疾病的反映49

四、基因因素对流感疾病的影响50

五、病毒对流感疾病的影响50

六、流感病毒感染中不多见的一些疾病50

七、并发症52

八、与流感易混淆的一些疾病53

九、超额死亡率54

第八章 流感的免疫56

一、概况56

二、流感免疫的特点56

三、非发特异性免疫56

四、特异性免疫57

五、个体免疫与感染和发病的关系60

六、人群免疫与流行发生和发展的关系61

第九章 流感的流行病学64

一、概况64

二、流行史64

三、传染源65

四、传播途径65

五、人群易感性66

六、影响流感流行的因素66

七、散发、爆发、流行及流行的含义68

八、旧流行株为何在人群中消失68

九、是否存在有流感流行中心68

十、的分子流行病学68

十一、实验室监测69

第十章 流感病毒的生态学71

一、概况71

二、猪群中的流感病毒72

三、马群中的流感病毒73

四、禽中流感病毒74

五、其它哺乳类动物中的流感病毒74

六、流感病毒致病性的分子基础75

第十一章 流感的防治77

一、概况77

二、流感美丽疫苗研究的现状77

三、防治的药物83

四、自我保护86

第二部分 实验技术87

第十一章 鸡胚培养法87

一、概况87

二、材料87

三、鸡胚的结构与生理87

四、接种技术88

第十三章 动物接种法91

一、概况91

二、材料91

三、接种途径91

四、采血法92

五、小鼠肺的采集及其悬液的制备93

第十四章 组织培养法94

一、概况94

二、材料94

三、组织培养技术95

第十五章 空斑及空斑减少中和试验97

一、概况97

二、材料97

三、操作步骤98

四、感染倍数99

第十六章 红细胞吸附及其抑制试验100

一、概况100

二、红细胞凝集试验100

三、红细胞凝集抑制试验102

第十七章 红细胞吸附及其抑制试验107

一、概况107

二、材料107

三、操作步骤107

第十八章 中和试验109

一、概况109

二、材料109

三、操作步骤109

第十九章 补体结合和间接补体结合试验120

一、概况120

二、材料121

三、操作步骤122

第二十章 对流免疫电泳技术129

一、概况129

二、材料129

三、操作步骤130

第二十一章 胎蛋白（Fetuin）底物提取法131

一、概况131

二、材料131

三、提取步骤131

第二十二章 流感病毒神经氨酸酶活性及其活性抑制试验133

一、概况133

二、材料133

三、操作步骤134

第二十三章 花生凝集素提取法137

一、概况137

二、材料137

三、提取步骤137

第二十四章 卵黄中抗流感病毒LG（LgY）的提取139

一、概况139

二、材料139

三、提取步骤139

第二十五章 凝集素神经氨酸酶活性（L-N）和凝集素神经氨酸酶活性抑制（L-NI）测定法141

一、概况141

二、材料141

三、操作步骤141

第二十六章 流感病毒的浓缩和纯化143

一、概况143

二、材料143

三、具体方法与步骤143

第二十七章 流感病毒单价抗原的获得及其免疫血清的制备145

一、概况145

二、材料145

三、方法145

第二十六章 琼脂免疫双扩散149

一、概况149

二、材料150

三、实验步骤150

第二十九章 单放射免疫扩散及火箭免疫电泳152

一、概况152

二、材料153

三、实验步骤154

第三十章 单放射免疫扩散溶血技术158

一、概况158

二、材料159

三、实验步骤160

四、注意事项161

第三十一章 杂交瘤技术162

一、概况162

二、材料162

三、操作步骤163

第三十二章 酶联免疫吸附试验(ELISA)167

一、概况167

二、ELISA的主要组成部分167

三、几种特殊的ELISA171

四、ELISA在流感病毒快速诊断中的应用172

第三十三章 免疫荧光技术174

一、概况174

二、材料174

三、荧光抗体染色法175

四、间接荧光抗体染色（IIF）在检测流感病毒中的应用176

第三十四章 一种简便的受体破坏酶（RDE）试剂制备法177

一、概况177

二、材料177

三、制备步骤177

四、RED的质量鉴定177

第三十五章 应用Directigen试剂快速诊断甲型流感病毒感染179

一、概况179

二、材料179

三、实验程序179

第三十六章 流感病毒感染小鼠肺重量测定法180

一、概况180

二、材料180

三、实验步骤180

第三十七章 流感病毒动物试验模型的快速建立法182

一、概况182

二、材料182

三、实验步骤182

第三十八章 流感病毒的分离与鉴定185

一、概况185

二、材料185

三、实验步骤186

第三十九章 流感的实验室诊断189

一、概况189

二、材料189

三、方法与步骤189

第四十章 流感病毒的传代与保存192

一、概况192

二、流感病毒的传代192

三、流感病毒的保存193

第四十一章 流感病毒RNA的提取法194

一、概况194

二、材料194

三、方法与步骤195

第四十二章 流感病毒核酸凝胶电泳199

一、概况199

二、材料201

三、实验步骤202

四、基因组单节段的分离205

第四十三章 流感病毒基因组寡核苷酸图谱分析206

一、概况206

二、材料206

三、实验步骤207

第四十四章 流感病毒的核苷酸序列测定211

一、概况211

二、材料212

三、方法与步骤212

四、基因进化223

第四十五章 流感病毒核酸斑点杂交（Dot llot）技术227

一、概况227

二、实验步骤227

第四十六章 RT-PCR限制性内切酶图谱分析234

一、概况234

二、具体例子234

三、实验步骤238

四、在流感病毒研究中的应用241

五、该法的优缺点241

第四十七章 流感病毒结构蛋白的凝胶电泳（RAGE）242

一、概况242

二、材料242

三、实验步骤243

第四十八章 一些常用溶液的配制245

一、生理盐水的配制245

二、75%酒精的配制245

三、Alsever氏液245

四、钙镁盐水的配制245

五、Versene溶液的配制245

六、10%蛋清盐水的制备245

七、脱脂奶的制备245

八、3%谷氨酰胺的配制246

九、10%十二（烷）酰甲基甘氨酸钠试剂246

十、Glycine（甘油）sodium lauroyl sarcosinate（Glycine sarkosyl buffer）246

十一、大磷酸盐缓冲液（Phosphate buffered saline, PBS,pH7.2）246

十二、Hank's溶液246

十三、5.6%NaHCO3的配制247

十四、1%酚红溶液247

十五、1：1000中性红溶液247

十六、0.25%胰酶溶液的配制247

十七、抗菌素的配制247

十八、10倍Eagle's母液的配备248

十九、Eagle's细胞生长液249

二十、Eagle's细胞维持液249